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八聯(lián)管離心機是一種利用離心力分離液體和固體顆粒,或液體和液體混合物中的每種成分的機器。八聯(lián)管離心機主要用于將懸浮液中的固體顆粒從液體中分離出來,或將兩種密度不同且互不相容的乳液中的液體分離。那么八聯(lián)管離心機常見的離心方式有哪些呢?
1、差速離心法:許多具有生物活性的生物大分子和亞細胞器不穩(wěn)定,需要低溫高速離心。常用的方法是差速離心。離心后,棄去上清,分離沉淀,將分離出的上清以增加的速度離心以分離沉淀的第二部分。這樣,速度不斷提高,需要的物質一步步分離出來。使用這種方法可以有效地分離出尺寸差異較大的顆粒,但無法分離出相同尺寸的顆粒,而且單個成分往往不均勻,與其他類型的顆粒混合。
2、區(qū)域離心法:其中可分為速度區(qū)離心和等密度速度區(qū)離心兩種。
(1)速度區(qū)域離心法:對于少量懸浮液,會產生一個小密度梯度,該梯度用于穩(wěn)定顆粒沉降。由于離心作用,顆粒從初始區(qū)域被去除。運動速度取決于顆粒的大小和形狀,以及它們所承受的實驗室八聯(lián)管離心機的離心力。離心一定時間后,各種薄片會根據(jù)它們的相對速度移動和分離,形成一系列區(qū)域。通過這種方式,我們可以將沉降速度的差異降低到 20% 或更多的顆粒。
(2)等壓區(qū)域離心法:將待分離顆粒的懸浮液置于密度梯度溶液中或實際將顆粒溶解在梯度溶液中。離心后,這些顆粒要么漂浮,要么下降,達到與自身密度相同的液體。他們在這里沒有重量。無論它們離心多久,它們都不會移動。這些粒子可以變成一系列區(qū)域,每個區(qū)域都在自己的密度區(qū)域中。因此,它是一種利用浮動密度粒度來分離粒度的技術。使用的介質通常是氯化銫 (Cscl) 和硫酸銫 (Cs2SO4)。前者適用于DNA提取,后者適用于RNA提取。與速度區(qū)離心法相比,這種方法的一個主要缺點是,在離心過程中,顆粒不可避免地暴露在具有高濃度梯度的溶液中,這會對顆粒造成局部損傷,并可能對顆粒造成損傷。