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美天旎磁珠分選

一、磁珠分類

1.什么是MACS磁珠？

MACS磁珠指與高度特異性的單克隆抗體相偶聯(lián)的超順磁化微粒，可用于目的細胞的磁性標記。

2.MACS磁珠分類

(1)直標磁珠：微珠通過偶聯(lián)的抗體，直接磁性標記細胞。

(2)間標磁珠：如果細胞群體沒有直接標記的磁珠，可以利用間接標記使得非偶聯(lián)的、生物素化的或者熒光素偶聯(lián)的一抗標記細胞；使用IGG、抗生物素鏈酶親和素或者抗熒光素的分別進行磁性標記。

(3)多選磁珠：微珠通過偶聯(lián)的抗體，直接磁性標記細胞，通過酶催化反應(yīng)，從抗體上解離。

(4)全血磁珠：從外周血中直接分選細胞，無需裂解紅細胞，無需密度梯度離心，直接上柱分選。對應(yīng)產(chǎn)品指標：CD3、CD4、CD8、CD14、CD15、CD19、CD33、CD45、CD56、CD66b（中性粒&嗜酸性）、CD138和anti-ROR1（慢性淋巴細胞白血?。?。

3.磁珠特點

(1)美天旎磁珠為nm級別磁珠，是目前最小的一款磁珠只有50nm，無需解離，可以直接進行流式檢測或培養(yǎng)臨床細胞治療中唯一可以使用的磁珠；

(2)磁性標記20%-30%的結(jié)合位點，不影響細胞的熒光抗體標記；

(3)磁珠主要成分是葡聚糖和氧化鐵，對細胞沒有毒性，不會影響細胞特性；美天旎磁珠可以生物降解；

(4)目前可提供凍干粉包裝的磁珠，凍干粉包裝有效期一般為2年。

二、如何選擇合適的分選器

MACS磁珠分選所用到的主要組分有：MACS磁珠、MACS分選柱和MACS分選器。為了方便客戶直接買齊磁珠分選的耗材和設(shè)備，Starting Kit起始套裝包括：分選器1個，分選架1個，分選柱1盒（25個），磁珠1盒。

1.手動分選產(chǎn)品

(1)MiniMACS Starting Kit （送磁珠）

(2)MidiMACS Starting Kit （送磁珠）  

(3)Mini & MidiMACS Starting Kit（送磁珠） 

(4)OctoMACS Starting Kit （送磁珠）

(5)QuadroMACS Starting Kit （送磁珠） 

(6)MACSxpress Separator

三、如何選擇合適的分選柱

MACS分選柱家族

1.陽性分選

磁性標記的細胞為目的細胞，簡單、快速。分選完后磁珠無需解離，可直接用于后續(xù)實驗。

①分選多少細胞

②分選常見細胞還是稀有細胞

為了在分選稀有細胞（表達頻率＜5%）過程中得到更高的純度，應(yīng)該使用兩個分選柱：用一根分選柱做第一次分選；陽性成分再過一次新的分選柱。陽性分選中連續(xù)使用2個分選柱，可以獲得更高的分選純度。

③是否分選大體積的細胞

如果要分選的目的細胞是體積較大的特殊細胞，如原生動物細胞、人皮膚郎罕式細胞、鼻咽癌細胞、心肌細胞等，那推薦您使用Large cell column。因為大細胞柱的鐵珠間隙足夠大，容許這些特殊的大體積細胞順利通過。

2.陰性分選

分選“未接觸細胞”，磁珠標記在非目的細胞上。

①使用MACS Cell Isolation kits 或 MACS MicroBeads？

②抗原表達是強還是弱？

③需要更高的純度還是回收率？

④分選多少細胞？

3.多重分選策略——獲得多參數(shù)細胞

先進行去除分選（第一步分選），然后進行陽性分選（第二步分選）。多選微珠再陽選。

4.分選柱和分選器的搭配